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無菌操(cao)作是(shi)微生物實驗、細胞培養等工作的(de)(de)基石。看似簡(jian)單的(de)(de)操(cao)作背后，卻(que)隱藏(zang)著許(xu)多容易(yi)忽視的(de)(de)誤區。

在實(shi)驗(yan)室環境中，一次微小的(de)污(wu)染(ran)事件便足(zu)以導致(zhi)長(chang)達數(shu)周的(de)實(shi)驗(yan)工作(zuo)前功盡棄。無(wu)論是(shi)珍貴細胞系(xi)被真(zhen)菌污(wu)染(ran)而(er)喪失活性，還是(shi)關鍵微生物實(shi)驗(yan)因雜菌侵入而(er)宣告失敗，均凸顯出無(wu)菌操作(zuo)技術在保(bao)障(zhang)實(shi)驗(yan)成功中的(de)核心地位(wei)。熟練(lian)掌握規范的(de)無(wu)菌操作(zuo)，不僅(jin)是(shi)一項基(ji)礎實(shi)驗(yan)技能，更(geng)體現了(le)科研人員嚴謹的(de)科學態度與專業的(de)實(shi)驗(yan)素養。

常見誤區與糾正指南

1乙醇消毒：萬能抑或局限？

? 錯誤認知：

在實(shi)驗操作中(zhong)，一種普(pu)遍存在的誤解是認為僅依靠酒精棉球對手部或臺面進行擦拭即(ji)可實(shi)現有效去(qu)污(wu)(wu)，甚至將乙醇溶液視作可替代一切滅菌措施的“萬能(neng)解決(jue)方案”。這種觀念(nian)往往導(dao)致對實(shi)驗器(qi)械及操作環境進行徹底滅菌的忽視，從而埋下污(wu)(wu)染隱患。

? 糾正指南：

75%的酒精具有(you)最佳的殺菌(jun)(jun)效果，但它(ta)只能表(biao)面消毒(du)，無法達到滅菌(jun)(jun)要(yao)求(qiu)（即(ji)殺死所有(you)微生物包括芽孢）。對(dui)于手術器械(xie)、培養基、試管等(deng)，必須采(cai)用高(gao)壓蒸(zheng)汽滅菌(jun)(jun)（121℃, 20-30分鐘）或(huo)干熱滅菌(jun)(jun)等(deng)物理方法。

實用貼士：

酒精擦拭后，務必等待其自然(ran)風干，揮發的(de)過(guo)程才(cai)是殺(sha)菌(jun)的(de)關鍵。切勿心急用嘴吹(chui)或(huo)用手扇(shan)。

2無菌手套(tao)：物理屏障或潛在污染源？

? 錯誤操作：

戴上無菌手套后，下意識地摸(mo)了(le)(le)摸(mo)頭發、調整了(le)(le)眼(yan)鏡(jing)、甚至接聽了(le)(le)電話……這些動作都會讓(rang)手套瞬間從(cong)“無菌”變(bian)為“有(you)菌”。

? 糾正指南：

將手(shou)套(tao)(tao)視為你的(de)“第二層皮膚”。它本身并不無(wu)菌，你的(de)手(shou)在哪個位(wei)置(zhi)，手(shou)套(tao)(tao)就在哪個位(wei)置(zhi)被污染(ran)。一(yi)旦觸摸了非無(wu)菌區域，應立即用75%酒精(jing)噴灑消毒(du)或更換新手(shou)套(tao)(tao)。

實用貼士：

在超凈臺內準備一個小型免洗消毒液瓶，隨時(shi)對手(shou)套進行消毒。操作時(shi)，手(shou)臂盡量不要離開臺面區域。

3超凈工作臺(tai)：相對(dui)潔凈而非(fei)絕對(dui)無菌

? 錯誤操作：

在(zai)超凈臺(tai)內擺放過多(duo)物品(pin)，操作時手臂(bei)頻繁穿(chuan)梭，快速移動(dong)產生(sheng)氣流，甚至有人在(zai)臺(tai)內大聲說話、咳嗽，這些都(dou)會破壞臺(tai)內的單向流氣流，導致污(wu)染(ran)。

? 糾正指南：

1. 物(wu)(wu)品(pin)分(fen)區：將臺面分(fen)為三(san)區。清潔區（遠離操作(zuo)(zuo)者的(de)一(yi)側(ce)）放置待使用的(de)無(wu)菌物(wu)(wu)品(pin)；操作(zuo)(zuo)區（中間）進行實驗(yan)；污(wu)染區（靠近操作(zuo)(zuo)者的(de)一(yi)側(ce)）放置廢(fei)棄物(wu)(wu)品(pin)。

2. 提前(qian)準備：將所有(you)所需物品(pin)一次(ci)性放入(ru)臺內，并經過紫外線照射30分鐘后再(zai)開始操作。

3. 動作(zuo)輕柔(rou)：所(suo)有操作(zuo)都應緩慢、輕柔(rou)，避(bi)免擾亂氣流。

4接種環燒一燒就夠了(le)？

? 錯誤操作：

將接種環在火焰(yan)外(wai)焰(yan)隨意晃兩下，沒有燒至通紅，或者(zhe)灼燒后未冷(leng)卻就直接蘸取菌液，燙死了待操作的微生物。

? 糾正指南：

采用全程灼燒(shao)法：先將接種環（針(zhen)）豎直插(cha)入火焰最底部的(de)藍色(se)內(nei)核部分，直至整體燒(shao)紅，并保持3-5秒。然后(hou)，灼燒(shao)可能(neng)進(jin)入試管的(de)金屬(shu)桿(gan)部分。最后(hou)，在空(kong)氣中冷卻(que)數秒（可靠近(jin)手(shou)背感知溫度，不燙(tang)即可），再進(jin)行取(qu)樣。

實用貼士：

灼燒后(hou)冷卻的接種環(huan)在放(fang)入(ru)菌液時不(bu)應發出“滋”的聲音。

無菌操作常見誤區與糾正指南

5培養基(ji)暴露：規范操作與無菌控(kong)制

? 錯誤操作：

打開培(pei)養皿(min)(min)或試管蓋后，長(chang)時間暴露在空氣中，或者將皿(min)(min)蓋完全取下、隨意放置。

? 糾正指南：

1.培養皿：打(da)開(kai)時(shi)，應將皿蓋(gai)開(kai)啟一個小于45°的(de)縫隙，剛好(hao)足(zu)以完(wan)成(cheng)(cheng)劃(hua)線(xian)或涂(tu)布(bu)操作即可。操作完(wan)成(cheng)(cheng)后立即蓋(gai)好(hao)。

2.試管/三角(jiao)瓶：開啟后(hou)，瓶口(kou)應迅速過火(huo)(huo)，利(li)用氣(qi)流原理形(xing)成(cheng)屏障，防止空(kong)氣(qi)中的雜菌落入。操作后(hou)同樣迅速過火(huo)(huo)并蓋(gai)緊。

實用貼士：

暫時不(bu)用(yong)的已(yi)倒平板，可用(yong)封(feng)口膜或Parafilm封(feng)口膜密(mi)封(feng)邊(bian)緣，防止水分蒸發和(he)污(wu)染。

無(wu)菌操作是一場與(yu)無(wu)處不(bu)在(zai)的(de)微(wei)生物(wu)進行的(de)“隱形戰(zhan)爭(zheng)”。勝利的(de)關鍵在(zai)于嚴謹的(de)態度、規范的(de)操作和對細節的(de)極致追求。記住，每(mei)一次成功的(de)實驗(yan)背(bei)后，都(dou)離不(bu)開無(wu)數個無(wu)菌操作的(de)精準瞬間。

本(ben)文(wen)由廣州佳譽醫(yi)療(liao)器械有(you)限公(gong)(gong)司/佛山浩揚(yang)醫(yi)療(liao)器械有(you)限公(gong)(gong)司聯合(he)編(bian)輯(ji)