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移液器清洗滅菌方法
實驗(yan)(yan)室的日常(chang)(chang)(chang)工作中(zhong),移液(ye)器(qi)是(shi)我(wo)們最(zui)親密、最(zui)常(chang)(chang)(chang)用的“伙伴(ban)”之(zhi)一。數據的準確(que)(que)性與可靠性,很大程度(du)上依賴(lai)于移液(ye)器(qi)的精(jing)確(que)(que)性和(he)潔凈(jing)度(du)。然而,許多實驗(yan)(yan)人員(yuan)有一個常(chang)(chang)(chang)見的誤區:認為(wei)移液(ye)器(qi)的清潔就是(shi)簡單(dan)地用酒精(jing)擦拭(shi)一下外部表面。
事實(shi)上,只清潔表面(mian)是遠遠不夠的(de)(de),甚(shen)至是危險(xian)的(de)(de)。 真正(zheng)的(de)(de)污染源和交(jiao)叉污染風險(xian),往往隱藏在移液(ye)器的(de)(de)內部。今天,我(wo)們(men)就來徹底(di)講(jiang)透(tou)移液(ye)器清潔與內部滅(mie)菌的(de)(de)正(zheng)確方(fang)法。
第一部分(fen):為什么“只擦(ca)表面”是(shi)重大(da)誤(wu)區?
移(yi)(yi)液(ye)器(qi)的(de)工作原理是通過(guo)活(huo)塞(sai)的(de)上(shang)下運動來(lai)吸(xi)液(ye)和(he)(he)放(fang)液(ye)。在這個過(guo)程中,氣溶膠、液(ye)體(ti)微(wei)滴甚(shen)至倒(dao)吸(xi)的(de)液(ye)體(ti),都(dou)會不可避免地進入移(yi)(yi)液(ye)器(qi)內部(bu)通道(dao)和(he)(he)活(huo)塞(sai)表面(mian)。
1.看不見的污(wu)(wu)染:即使外部(bu)擦拭(shi)得光亮如(ru)新,內部(bu)通道可能已(yi)經積累了樣品殘留、微(wei)生物(wu)或(huo)核酸酶(mei)。這些污(wu)(wu)染物(wu)會成為下(xia)一次移(yi)液的污(wu)(wu)染源,導致(zhi):
2.樣本間交叉污染:嚴重影響實(shi)驗(yan)結果的準確性,尤其是對PCR、qPCR等超敏(min)感(gan)實(shi)驗(yan)可能是毀滅性的。
3.微生物污染:在細胞培養、微生物實(shi)驗中(zhong)引入雜菌,導致實(shi)驗失敗。
4.腐蝕(shi)活塞和密封圈:高鹽、酸性(xing)或有機溶劑殘留會加速內部元件(jian)的(de)腐蝕(shi)和老化(hua),影響移液(ye)精度(du)和使(shi)用壽命(ming)。
因此,定期對(dui)移(yi)液器內部進行(xing)徹底的清(qing)潔(jie)和滅菌,不是“可(ke)選(xuan)(xuan)項(xiang)”,而是“必選(xuan)(xuan)項(xiang)”。
第二部分:移液器內部滅菌的(de)正確步(bu)驟(通用(yong)流程)
在(zai)進行任何操作(zuo)前,請(qing)務必閱讀您所用移液器的廠家說(shuo)明(ming)書,因(yin)為不同品(pin)牌(pai)、型號的移液器其耐受性和拆卸方式(shi)可能(neng)不同。
第一步:準備(bei)工作與外部(bu)清潔
1.設(she)置工作區:在潔凈的臺面上(shang)進行操(cao)作,準備好手套。
2.卸(xie)下(xia)吸頭推出器(如可拆(chai)卸(xie)):許(xu)多(duo)移液器的下(xia)半(ban)部分套(tao)筒可以(yi)旋開。
3.外部(bu)清(qing)潔(jie):用無絨布蘸取適量清(qing)水、肥皂水或70%乙(yi)醇,仔細擦拭移液器外壁,去(qu)除表(biao)面的污垢(gou)和微(wei)生物。避免讓(rang)液體滲入(ru)內部(bu)。
第二步:拆卸移液器
這是(shi)接觸內部、進行深度清潔的(de)關鍵一步。
1.解鎖拆卸:參照說明(ming)書,通常通過旋(xuan)轉(zhuan)或按壓特定卡扣,將移(yi)液(ye)器(qi)下半部(吸(xi)頭承接器(qi)部分)與(yu)上半部(機身)分離。
2.取(qu)出內部組件:小心(xin)地取(qu)出活塞(sai)、密(mi)封圈(O-ring)等核心(xin)部件。有些(xie)移液器是(shi)一體(ti)式活塞(sai)桿,有些(xie)則是(shi)分體(ti)式。務必輕柔操(cao)作,避免劃傷(shang)精(jing)密(mi)活塞(sai)表面。
第三步:清潔與浸泡
1.清洗:用溫和的肥皂水或去離子(zi)水沖(chong)洗拆卸下來的所有部件(jian)(下半部套筒、活塞(sai)、密封圈(quan)等)。對于頑固(gu)污(wu)漬,可用軟毛(mao)刷(shua)輕(qing)輕(qing)刷(shua)洗。
2.浸泡滅菌(根據實(shi)驗需求選擇合適方法):
化學浸泡滅菌(適用所(suo)有移(yi)液器(qi)部(bu)件(jian)):
常用(yong)消毒劑(ji):75%乙(yi)醇(chun)、異(yi)丙(bing)醇(chun)、稀漂(piao)白液(次氯酸鈉,需(xu)注意濃度(du),通(tong)常1:10稀釋,浸泡后(hou)需(xu)徹底沖洗以免腐(fu)蝕)、專業多酶清洗液。
操作:將拆卸下的所有非金(jin)屬部件(jian)完全浸(jin)沒在消(xiao)毒液中,浸(jin)泡30分鐘以(yi)上(具體時間參考消(xiao)毒劑說明和移液器說明書)。注(zhu)意:確保所使(shi)用的消(xiao)毒劑與移液器材料(liao)相容,避免(mian)腐蝕塑料(liao)部件(jian)。
高溫高壓滅菌(jun)(僅適用(yong)于有“autoclavable”標(biao)識的移液器):
準(zhun)備(bei)工作:將移(yi)液器拆卸。通常機(ji)身(上半部(bu)分)不能高溫滅菌。只有(you)下(xia)半部(bu)套筒、活塞桿(gan)等部(bu)件(jian)可以(yi)滅菌。務必確認所有(you)要滅菌的(de)部(bu)件(jian)都(dou)耐(nai)高溫。
包裝:將所有(you)可(ke)滅菌部件用牛皮紙、滅菌袋或鋁箔(bo)紙包好,并標注日期。
滅(mie)菌(jun)參數:通(tong)常(chang)采用121℃,1bar(100kPa),滅(mie)菌(jun)20-30分(fen)鐘。請嚴格遵守移(yi)液器說明書(shu)推薦的(de)滅(mie)菌(jun)時間和(he)溫(wen)度。切勿(wu)過熱,否(fou)則會損(sun)壞部(bu)件。
冷卻與干燥:滅菌完成后,在無菌環境下取(qu)出(chu)部件,并務必讓其充分(fen)冷卻和干燥后再(zai)進行組裝。熱部件立即組裝會產生水汽(qi),影響(xiang)密(mi)封性(xing)和精度(du)。
第(di)四(si)步:重新組裝與校準(zhun)
1.徹底干燥:將所有清洗和滅菌(jun)后的部件放在無絨布上完全晾干。確保沒(mei)有任(ren)何液體殘留,特別是密封圈(quan)區域。
2.涂抹潤滑油:根(gen)據說明書建議,在活塞上涂抹少量專用的移液器硅脂潤滑油。這能保證活塞運動順(shun)滑,保持密封(feng)性和延(yan)長壽命(ming)。切(qie)忌使(shi)用過多。
3.小(xiao)心組(zu)裝:按照反向順序重新(xin)組(zu)裝所(suo)有部件。確保各部位安裝到位,卡(ka)扣鎖緊。
4.性能檢查(校準):經(jing)過(guo)拆(chai)卸和滅菌(jun)后(hou),強(qiang)烈建議對移液器進行精度(du)和準確度(du)的檢查( gravimetric 稱重(zhong)法校準)。這是確保其恢復最佳工作狀態的最后(hou)、也是最重(zhong)要的一步。
第(di)三(san)部分:不同(tong)場(chang)景(jing)下的維護(hu)頻率建(jian)議
日常:每(mei)次(ci)使用后,用70%乙醇擦拭表面。
常(chang)規:每月或每季度進行一次內部清潔(視使用頻率而定)。
強制性:
在轉換不同樣品,特別是涉及(ji)DNA、RNA、放射(she)性或腐蝕(shi)性樣品時。
在進(jin)行細(xi)胞培養、微(wei)生(sheng)物(wu)實(shi)驗前。
當移(yi)液(ye)器(qi)被液(ye)體完全污(wu)染或倒(dao)吸時(需(xu)立即處理!)。
根(gen)據(ju)實(shi)驗室質量管理體系(如GLP/GMP)規定的周期。
總結與警示
忌:將整支(zhi)未拆卸的移(yi)液器(qi)直(zhi)接浸(jin)泡入消毒液中(zhong)或(huo)進行(xing)高(gao)溫滅菌。
忌:使用(yong)腐蝕(shi)性強的溶劑(如丙(bing)酮、強酸強堿(jian))清(qing)洗部(bu)件。
忌:在部件未(wei)完全(quan)干燥時強行組裝。
忌:忽略潤滑(hua)和校準步驟。
移液(ye)器是科學(xue)家手的(de)(de)延(yan)伸(shen),它的(de)(de)“健(jian)康”直接(jie)關系到實驗(yan)數據的(de)(de)“生(sheng)命”。摒棄“只(zhi)擦表(biao)面”的(de)(de)僥幸心理,建立科學(xue)、規范的(de)(de)移液(ye)器清潔與滅菌流程,是對您實驗(yan)成果(guo)最(zui)基本(ben)、也是最(zui)關鍵(jian)的(de)(de)保(bao)障。
附錄:快速參考表
步驟
關鍵動作
注意事項
1.準備與外部清潔
卸下推(tui)出器(qi),用酒精棉擦拭外壁
防止液體流入內部
2.拆卸
參照說明書(shu),分離下半部,取出(chu)活塞(sai)和密封圈
輕(qing)柔操(cao)作,避(bi)免劃(hua)傷活塞
3.清潔與滅菌
化學浸泡
:75%酒精等,浸(jin)泡30min+
高溫滅菌
:121°C, 20-30min
確認材料相(xiang)容性,僅滅菌耐高溫部件
4.干燥與組裝
部(bu)件(jian)完(wan)全(quan)晾干,活塞涂少量(liang)硅脂(zhi),小心組裝
確保(bao)絕對干燥(zao),潤滑脂寧少勿(wu)多
5.校準
進行精度(du)和準確度(du)檢查
確保移液性能恢復
本文(wen)由廣州佳譽醫療器械有限(xian)公司/佛山浩揚醫療器械有限(xian)公司聯合編輯