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移液器內部滅菌的正確步驟
在實驗(yan)室的日常工作中,移(yi)液(ye)(ye)器是我們(men)最親密、最常用(yong)的“伙伴”之一(yi)。數據的準確性(xing)與可(ke)靠性(xing),很大程度(du)上依(yi)賴于(yu)移(yi)液(ye)(ye)器的精確性(xing)和潔(jie)凈(jing)度(du)。然而,許多實驗(yan)人(ren)員有(you)一(yi)個常見(jian)的誤區:認為移(yi)液(ye)(ye)器的清潔(jie)就(jiu)是簡單地用(yong)酒(jiu)精擦拭一(yi)下外部表面。
事實(shi)上,只(zhi)清(qing)潔(jie)表面是遠遠不夠的(de)(de)(de),甚(shen)至(zhi)是危險的(de)(de)(de)。 真正的(de)(de)(de)污染(ran)源和交叉污染(ran)風險,往往隱藏在移液(ye)(ye)器的(de)(de)(de)內(nei)部。今(jin)天,我們就來徹底(di)講透(tou)移液(ye)(ye)器清(qing)潔(jie)與內(nei)部滅菌(jun)的(de)(de)(de)正確方(fang)法。
為什么(me)“只擦表面(mian)”是重大誤區
移(yi)液(ye)器的工作原理是通(tong)過(guo)活塞的上下運動來吸(xi)液(ye)和放液(ye)。在(zai)這個過(guo)程中(zhong),氣溶膠、液(ye)體微滴甚至倒吸(xi)的液(ye)體,都會不可避免地進(jin)入(ru)移(yi)液(ye)器內(nei)部通(tong)道和活塞表面。
看不見的污染(ran):即使外部擦拭得光亮如新,內部通道可能(neng)已經積累了(le)樣品(pin)殘留、微生物或核酸酶。這些(xie)污染(ran)物會成為下一(yi)次移(yi)液的污染(ran)源,導致: 樣本間交叉污染(ran):嚴重影響實驗結果的準確性(xing),尤其(qi)是對PCR、qPCR等超(chao)敏感實驗可能(neng)是毀(hui)滅(mie)性(xing)的。
微(wei)生物污(wu)染:在細胞培養、微(wei)生物實(shi)(shi)驗中引入雜菌,導致實(shi)(shi)驗失敗。
腐蝕(shi)活塞和密封圈:高鹽、酸性或有機(ji)溶劑(ji)殘(can)留會加速內部元件的(de)腐蝕(shi)和老化,影響移(yi)液精度和使用壽(shou)命。因(yin)此,定期對移(yi)液器內部進行徹底的(de)清(qing)潔(jie)和滅菌,不是“可選項”,而是“必選項”。
移液器(qi)內部滅(mie)菌(jun)的正確步(bu)驟
在進行任何操作前,請(qing)務必(bi)閱讀(du)您所用移(yi)液器(qi)的廠(chang)家說明書,因為不(bu)同(tong)(tong)品(pin)牌(pai)、型號的移(yi)液器(qi)其耐受(shou)性和拆(chai)卸方式可能不(bu)同(tong)(tong)。
第一步:準(zhun)備工作(zuo)與外部清(qing)潔
1、設置工作(zuo)區:在潔凈的臺面(mian)上進行操(cao)作(zuo),準(zhun)備好手套。
2、卸下吸頭推出器(如(ru)可(ke)拆卸):許多移液器的下半部(bu)分套筒可(ke)以旋開(kai)。
3、外(wai)部清潔:用無絨布(bu)蘸取適量(liang)清水(shui)、肥皂水(shui)或70%乙(yi)醇,仔細擦拭移液器外(wai)壁,去除表面的污(wu)垢和(he)微生物。避(bi)免讓液體滲(shen)入內部。
第二(er)步:拆卸移液器這是接(jie)觸內部、進行深度清潔(jie)的關鍵一步。
1、解鎖拆卸:參照說明書,通(tong)常(chang)通(tong)過旋轉或按壓特定卡扣,將移液器下半(ban)部(bu)(bu)(吸頭承接器部(bu)(bu)分(fen))與上(shang)半(ban)部(bu)(bu)(機身)分(fen)離。
2、取出內部組件:小心地(di)取出活塞、密封圈(O-ring)等核心部件。有(you)些移(yi)液器是一體式(shi)活塞桿,有(you)些則是分(fen)體式(shi)。務(wu)必輕柔操作(zuo),避免劃傷精密活塞表面。
第三步:清潔與浸泡
1、清洗(xi):用溫(wen)和(he)的肥(fei)皂水或(huo)去離(li)子水沖洗(xi)拆卸下(xia)來的所有(you)部件(下(xia)半(ban)部套筒、活塞、密(mi)封圈等)。對于頑固污漬(zi),可用軟(ruan)毛刷(shua)輕輕刷(shua)洗(xi)。
2、浸(jin)泡滅菌(jun)(根據實驗需求選(xuan)擇合(he)適(shi)方法):
化學浸(jin)泡(pao)滅菌(適用所(suo)有移液器部件):
常用消毒(du)劑(ji):75%乙醇(chun)、異丙醇(chun)、稀漂(piao)白液(次(ci)氯酸鈉,需注意(yi)濃(nong)度,通(tong)常1:10稀釋,浸泡后需徹底(di)沖洗以(yi)免(mian)腐(fu)蝕)、專業多酶清洗液。
操作:將拆卸下的所(suo)有非金屬(shu)部件完全浸(jin)沒在(zai)消(xiao)毒(du)液中(zhong),浸(jin)泡30分鐘以上(具體時間參(can)考消(xiao)毒(du)劑說明和移液器說明書(shu))。注意:確保所(suo)使(shi)用的消(xiao)毒(du)劑與移液器材料(liao)相容,避免腐蝕塑料(liao)部件。
高溫高壓滅菌(jun)(僅(jin)適用于(yu)有“autoclavable”標識的(de)移液器):
準備工(gong)作:將移(yi)液器拆卸(xie)。通(tong)常機(ji)身(shen)(上半部分)不能高溫(wen)滅菌。只有下半部套筒、活塞桿等(deng)部件可(ke)以(yi)滅菌。務必確認(ren)所有要(yao)滅菌的(de)部件都耐高溫(wen)。
包(bao)裝:將所有(you)可(ke)滅菌部件用牛皮紙(zhi)、滅菌袋或鋁箔(bo)紙(zhi)包(bao)好,并(bing)標注日期(qi)。
滅(mie)菌(jun)參數:通(tong)常采用121°C,1 bar (100 kPa),滅(mie)菌(jun)20-30分鐘。請嚴格遵守移液器說明書推(tui)薦(jian)的滅(mie)菌(jun)時間和(he)溫度。切勿過熱,否則會損壞(huai)部件(jian)。
冷(leng)(leng)卻(que)與(yu)干(gan)燥(zao):滅菌完成(cheng)后,在無(wu)菌環(huan)境下取出部件(jian)(jian),并(bing)務必讓(rang)其充分(fen)冷(leng)(leng)卻(que)和(he)干(gan)燥(zao)后再(zai)進行組裝。熱部件(jian)(jian)立即組裝會產生水汽,影響密封性和(he)精度。
第四步:重新組裝與校準
1、徹(che)底干燥:將所有清洗和滅菌(jun)后的部件放在無絨布上完全晾(liang)干。確保沒有任何液體(ti)殘留,特(te)別是(shi)密封圈(quan)區(qu)域。
2、涂抹潤滑油:根(gen)據(ju)說明書建議,在活(huo)塞(sai)上涂抹少量(liang)專用的移液器硅脂潤滑油。這能保證活(huo)塞(sai)運動順滑,保持密封性和延長壽命。切忌使用過多。
3、小心組裝(zhuang):按照反向順序重(zhong)新組裝(zhuang)所有部件。確保各(ge)部位安裝(zhuang)到位,卡扣鎖緊。
4、性能檢查(cha)(校(xiao)準):經(jing)過拆卸和滅菌(jun)后,強(qiang)烈(lie)建議對移(yi)液器(qi)進行精度和準確度的檢查(cha)( gravimetric 稱重法校(xiao)準)。這是確保其(qi)恢(hui)復最佳工作狀態的最后、也是最重要的一步。
不同場景下的維護頻率建議
日(ri)常:每次使用后,用70%乙醇擦拭表面。
常(chang)規:每(mei)(mei)月或每(mei)(mei)季度進(jin)行一次內(nei)部清潔(視使用頻率而定)。
強制性:
在轉換不同樣品(pin),特別是(shi)涉及DNA、RNA、放射(she)性或腐蝕性樣品(pin)時(shi)。
在進行(xing)細(xi)胞培養、微生物實驗前。
當移液器被液體完(wan)全污(wu)染或倒吸時(需立即處理!)。
根(gen)據實驗室質量管理體系(如(ru)GLP/GMP)規(gui)定的(de)周期。
總結與警示
忌:將整支未拆卸的(de)移液器直接浸泡入消毒液中或進行高溫滅菌。
忌:使用(yong)腐蝕性強的溶(rong)劑(如丙酮、強酸(suan)強堿)清洗部件。
忌(ji):在(zai)部件未完全干燥時強(qiang)行組裝。
忌:忽略潤滑(hua)和校準步驟(zou)。
移(yi)液器是科學家手的(de)(de)延伸,它的(de)(de)“健康”直接關系到實驗(yan)數據的(de)(de)“生(sheng)命”。摒棄(qi)“只(zhi)擦(ca)表面(mian)”的(de)(de)僥幸心理,建立科學、規范的(de)(de)移(yi)液器清潔與滅菌流程,是對您實驗(yan)成(cheng)果最基本、也(ye)是最關鍵(jian)的(de)(de)保障。
本文由(you)廣州佳譽醫療(liao)(liao)器械有限公(gong)司/佛(fo)山(shan)浩揚(yang)醫療(liao)(liao)器械有限公(gong)司聯(lian)合編輯