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紫(zi)外(wai)分(fen)(fen)光(guang)光(guang)度(du)法(fa)是(shi)(shi)根(gen)據物(wu)質的(de)(de)吸收光(guang)譜，來(lai)(lai)研(yan)究物(wu)質的(de)(de)成分(fen)(fen)、結構和物(wu)質間相(xiang)互作用的(de)(de)有效手段。紫(zi)外(wai)分(fen)(fen)光(guang)光(guang)度(du)計(ji)可以(yi)在紫(zi)外(wai)可見光(guang)區任意(yi)選擇不同波長的(de)(de)光(guang)。紫(zi)外(wai)分(fen)(fen)光(guang)光(guang)度(du)計(ji)的(de)(de)使(shi)用及校準需(xu)要(yao)注意(yi)哪些問題呢？跟(gen)小(xiao)理一(yi)起來(lai)(lai)看(kan)看(kan)吧物(wu)質的(de)(de)吸收光(guang)譜就是(shi)(shi)物(wu)質中(zhong)的(de)(de)分(fen)(fen)子(zi)(zi)和原子(zi)(zi)吸收了入射光(guang)中(zhong)的(de)(de)某些特定波長的(de)(de)光(guang)能量，相(xiang)應地發生了分(fen)(fen)子(zi)(zi)振動能級(ji)躍遷(qian)和電子(zi)(zi)能級(ji)躍遷(qian)的(de)(de)結果(guo)。

由于各(ge)種物(wu)(wu)質具有各(ge)自(zi)不(bu)同(tong)的(de)(de)(de)分子(zi)、原子(zi)和(he)不(bu)同(tong)的(de)(de)(de)分子(zi)空(kong)間結構，其(qi)(qi)吸(xi)收光能量(liang)的(de)(de)(de)情(qing)況也(ye)就不(bu)會(hui)相(xiang)同(tong)，因此，每種物(wu)(wu)質就有其(qi)(qi)特(te)有的(de)(de)(de)、固定的(de)(de)(de)吸(xi)收光譜曲線，可(ke)根據吸(xi)收光譜上的(de)(de)(de)某些特(te)征波長處的(de)(de)(de)吸(xi)光度的(de)(de)(de)高低判(pan)別或測定該物(wu)(wu)質的(de)(de)(de)含量(liang)。

紫外分光光度計用途

1、檢定物質

根據吸(xi)(xi)收(shou)光譜圖上(shang)(shang)的(de)一些特征吸(xi)(xi)收(shou)，特別是(shi)最大吸(xi)(xi)收(shou)波(bo)長(chang)λ-max和摩(mo)爾吸(xi)(xi)收(shou)系(xi)數ε是(shi)檢定(ding)物(wu)(wu)質的(de)常用(yong)物(wu)(wu)理(li)參數。這在(zai)藥(yao)物(wu)(wu)分析(xi)上(shang)(shang)就(jiu)有著很(hen)廣泛的(de)應(ying)用(yong)。在(zai)國內外(wai)的(de)藥(yao)典中，已將眾多的(de)藥(yao)物(wu)(wu)紫外(wai)吸(xi)(xi)收(shou)光譜的(de)最大吸(xi)(xi)收(shou)波(bo)長(chang)和吸(xi)(xi)收(shou)系(xi)數載入(ru)其中，為藥(yao)物(wu)(wu)分析(xi)提供了(le)很(hen)好的(de)手(shou)段。

2、與(yu)標(biao)準物及(ji)標(biao)準圖(tu)譜對照

將分析樣(yang)品(pin)(pin)和(he)(he)標準樣(yang)品(pin)(pin)以相同(tong)(tong)(tong)(tong)濃度配制(zhi)在同(tong)(tong)(tong)(tong)一溶劑(ji)中，在同(tong)(tong)(tong)(tong)一條件下(xia)分別測(ce)定紫外可見吸(xi)收光(guang)譜。若(ruo)兩(liang)(liang)者是同(tong)(tong)(tong)(tong)一物質，則(ze)兩(liang)(liang)者的(de)光(guang)譜圖應完(wan)全一致。如(ru)果沒有標樣(yang)，也可以和(he)(he)現成的(de)標 準譜圖對照(zhao)進行比(bi)較。這種方法要(yao)求儀器準確，精(jing)密度高，且測(ce)定條件要(yao)相同(tong)(tong)(tong)(tong)。

3、比(bi)較最大(da)吸收(shou)波長吸收(shou)系數的一(yi)致(zhi)性

4、純度檢驗

5、推(tui)測化合物的分(fen)子結構(gou)

6、氫鍵強度的測定

實(shi)驗證明，不同(tong)的極性溶(rong)(rong)劑(ji)(ji)產(chan)生(sheng)氫鍵的強(qiang)度(du)(du)也不同(tong)，這可以利用紫外光譜(pu)來判斷化合物在(zai)不同(tong)溶(rong)(rong)劑(ji)(ji)中氫鍵強(qiang)度(du)(du)，以確定選擇哪一種溶(rong)(rong)劑(ji)(ji)。

7、絡合物組(zu)成及穩定常(chang)數的測定：

8、反應動力學研究

9、在有(you)機分析中的應用

有(you)機(ji)分(fen)析是一門研究(jiu)有(you)機(ji)化合(he)物(wu)的分(fen)離、鑒(jian)別(bie)及組成結構測定的科學(xue)，它是在有(you)機(ji)化學(xue)和分(fen)析化學(xue)的基(ji)礎上發展(zhan)起(qi)來的綜(zong)合(he)性學(xue)科。

紫外分光光度計使用注意(yi)事項

1、溫度和濕(shi)度是影響儀器性能的(de)重要因素：

他們(men)可以引起(qi)機械部(bu)件(jian)的銹蝕，使金屬鏡面(mian)的光(guang)(guang)潔度下降，引起(qi)儀器(qi)機械部(bu)分的誤差或性能下降；造(zao)成光(guang)(guang)學部(bu)件(jian)如光(guang)(guang)柵、反射鏡、聚焦鏡等(deng)(deng)的鋁膜銹蝕，產生光(guang)(guang)能不足、雜散光(guang)(guang)、噪聲等(deng)(deng)，甚至(zhi)儀器(qi)停(ting)止工(gong)作，從而影響儀器(qi)壽(shou)命。維護保養時(shi)應定期加以校正。使用紫外分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計應具備四(si)季(ji)恒(heng)濕的儀器(qi)室，配(pei)置恒(heng)溫設(she)備，特別是地處南方地區的實驗室。

2、環境中的塵埃和(he)腐蝕(shi)性氣(qi)體(ti)

亦可以影響機械系統的靈活性、降低各(ge)種限(xian)位(wei)開關、按鍵、光(guang)電偶合器的可靠性，也是造成必須學(xue)部件鋁膜銹蝕的原因之一(yi)：

因此(ci)，使(shi)用紫外分光(guang)光(guang)度(du)計必(bi)須定期清(qing)潔(jie)，保障環境和(he)儀器室內衛生條件，防塵。

3、除塵

紫外(wai)分光光度計(ji)儀(yi)器使(shi)用一(yi)定(ding)(ding)周(zhou)期后(hou)，內部(bu)會積累(lei)一(yi)定(ding)(ding)量的(de)塵埃，最好由維修(xiu)工(gong)(gong)程(cheng)師或在工(gong)(gong)程(cheng)師指導下定(ding)(ding)期開啟儀(yi)器外(wai)罩對內部(bu)進行除塵工(gong)(gong)作：

同時，將各(ge)發熱(re)元(yuan)件(jian)的散熱(re)器重新緊固，對(dui)光學盒的密封窗口(kou)進(jin)行清潔，必要(yao)時對(dui)光路進(jin)行校(xiao)準，對(dui)機械部分進(jin)行清潔和必要(yao)的潤(run)滑(hua)。最(zui)后，恢復原(yuan)狀(zhuang)，再進(jin)行一些必要(yao)的檢測(ce)(ce)、調校(xiao)與記錄。分析儀(yi)器工作(zuo)者要(yao)懂得儀(yi)器的日常維護(hu)和對(dui)主(zhu)要(yao)技術指標的簡易測(ce)(ce)試方法，自己經常對(dui)儀(yi)器進(jin)行維護(hu)和測(ce)(ce)試，以保證儀(yi)器工作(zuo)在最(zui)佳(jia)狀(zhuang)態。

紫外可見分光光度計詳細操作(zuo)流程及校準(zhun)方法

1、紫外可見分(fen)光(guang)光(guang)度計(ji)光(guang)度測(ce)量

在模式(shi)選(xuan)擇屏幕中選(xuan)擇＜1.Photometric光度＞選(xuan)項，將顯示參(can)數配置屏幕；

用GOTOWL鍵設定測量(liang)波(bo)長(chang)；

按F2鍵設(she)定進樣控制；

按START/STOP鍵時，測(ce)量開始，顯示測(ce)量屏幕；

如需做空白(bai)校正，應在測量前先(xian)設置(zhi)空白(bai)樣(yang)品(pin)，然后，按AUTO-ZERO鍵，將測量值置(zhi)為OABS（100%）；

2、紫外可(ke)見分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計校正(zheng)

開機預熱10分鐘足矣；
放入黑塊和標樣（沒有的自己配），關閉蓋子；
校0；
把燈光對著黑塊，把透光度調0；
把燈光對標樣，將吸光度(du)調到100%；

3、參比溶液介紹

參比溶液(ye)(ye)又稱空(kong)白溶液(ye)(ye)。測量時(shi)(shi)用作比較(jiao)的(de)(de)、不(bu)含被測物質(zhi)(zhi)但(dan)其基體盡可(ke)能與試樣溶液(ye)(ye)相(xiang)似的(de)(de)溶液(ye)(ye)。通常(chang)，用參比溶液(ye)(ye)掃描的(de)(de)曲線應是一條平(ping)坦的(de)(de)直線。有(you)時(shi)(shi)，基體中，雖不(bu)含被測物質(zhi)(zhi)，但(dan)含有(you)別(bie)的(de)(de)物質(zhi)(zhi)，這時(shi)(shi)必(bi)須(xu)保證其不(bu)影響(xiang)測試。經(jing)常(chang)碰到的(de)(de)是試劑空(kong)白中含有(you)被測物質(zhi)(zhi)，此時(shi)(shi)必(bi)須(xu)經(jing)過純化將(jiang)其除去。否則將(jiang)影響(xiang)測定結(jie)果(guo)。

4、紫(zi)外可見(jian)分(fen)光光度計使(shi)用注意事項

①開機前應先預熱15分鐘，然后開機自檢；
②濕度要控制在75%左右，溫度在5～30度之間；
③儀器(qi)要(yao)穩(wen)壓電(dian)源(yuan)，接地要(yao)好。并且避(bi)免陽光直(zhi)接照射；

5、常見(jian)故障及處理方法

光門不能完全關閉：修復光門部件，使其完全關閉；
透過率“100%”旋到底了。解決方法：重新調整“100%”旋鈕；
儀(yi)器(qi)(qi)(qi)嚴重受潮：可打(da)開光(guang)電(dian)管暗盒，用電(dian)吹風吹上(shang)一會兒使其干(gan)燥(zao)，并更換干(gan)燥(zao)劑分(fen)析(xi)儀(yi)器(qi)(qi)(qi)工作者要懂(dong)得儀(yi)器(qi)(qi)(qi)的日常(chang)維護和(he)對主要技術指標的簡(jian)(jian)易測(ce)試方法，自己經常(chang)對儀(yi)器(qi)(qi)(qi)進(jin)行維護和(he)測(ce)試，以保證儀(yi)器(qi)(qi)(qi)工作在(zai)理想狀態(tai)。下面簡(jian)(jian)要介(jie)紹一下紫外(wai)可見分(fen)光(guang)光(guang)度計(ji)的維護保養方法。

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